Porque coletar coletar DNA?
A coleta de DNA é um procedimento fundamental em várias áreas da biologia e da medicina, incluindo pesquisas genéticas, medicina forense e diagnóstico de doenças. Este guia detalha o processo de coleta de DNA, desde a preparação até a extração e armazenamento, fornecendo um passo a passo completo e fácil de seguir.
Passo a Passo para Coletar DNA:
1. Preparação:
Materiais Necessários
- Luvas descartáveis
- Swabs estéreis (cotonetes de coleta)
- Tubos de coleta estéreis ou recipientes de armazenamento
- Solução salina estéril (opcional)
- Álcool isopropílico (para desinfecção)
- Sacos de armazenamento ou envelopes para transporte
- Etiquetas para identificação
- Formulário de consentimento (se aplicável)
- Kit de extração de DNA (opcional, dependendo do método de extração)
Ambiente de Trabalho
Certifique-se de que o ambiente de trabalho esteja limpo e livre de contaminantes. Desinfete todas as superfícies de trabalho com álcool isopropílico.
2. Coleta de Amostras de DNA:
Coleta de Saliva:
- Lavar as Mãos: Lave as mãos com água e sabão antes de iniciar o procedimento.
- Usar Luvas: Coloque luvas descartáveis para evitar contaminação.
- Preparar o Swab: Retire um swab estéril da embalagem sem tocar na ponta.
- Coletar Saliva: Peça à pessoa para abrir a boca e esfregue suavemente a ponta do swab na parte interna da bochecha por 30 a 60 segundos, girando o swab para coletar células suficientes.
- Armazenar o Swab: Coloque o swab no tubo de coleta estéril e feche bem a tampa.
Coleta de Sangue (via punção digital)
- Lavar as Mãos: Lave as mãos e coloque luvas descartáveis.
- Desinfetar a Área: Use álcool isopropílico para desinfetar a ponta do dedo da pessoa.
- Usar Lanceta: Utilize uma lanceta estéril para fazer uma pequena punção na ponta do dedo.
- Coletar Sangue: Deixe uma gota de sangue cair em um cartão de coleta de sangue (filtro de papel estéril) ou em um tubo de coleta de sangue.
- Armazenar a Amostra: Deixe o sangue secar se for em um cartão de coleta ou feche bem o tubo de coleta.
Coleta de Cabelo
- Lavar as Mãos: Lave as mãos e coloque luvas descartáveis.
- Coletar Cabelos: Puxe cerca de 10 a 15 fios de cabelo com a raiz (bulbo) anexada.
- Armazenar os Cabelos: Coloque os cabelos em um saco de armazenamento estéril ou envelope.
3. Identificação e Armazenamento:
- Etiquetar Amostras: Identifique cada amostra com etiquetas apropriadas contendo informações como nome do doador, data e tipo de amostra.
- Armazenamento: Armazene as amostras em local adequado. Amostras de saliva e cabelo podem ser armazenadas à temperatura ambiente, enquanto amostras de sangue podem precisar de refrigeração ou congelamento.
4. Extração de DNA:
Métodos de Extração
A extração de DNA pode ser realizada em um laboratório utilizando kits de extração de DNA disponíveis comercialmente ou métodos manuais. Aqui está um método básico de extração utilizando um kit de extração de DNA:
- Lise das Células: Adicione a amostra de DNA a uma solução de lise fornecida no kit para quebrar as células e liberar o DNA.
- Precipitação do DNA: Adicione uma solução de precipitação para separar o DNA das proteínas e outros componentes celulares.
- Lavagem do DNA: Lave o DNA precipitado com uma solução de lavagem para purificar ainda mais a amostra.
- Resuspensão do DNA: Resuspenda o DNA purificado em uma solução de armazenamento (geralmente TE buffer ou água estéril).
5. Armazenamento do DNA Extraído:
Armazene o DNA extraído em um freezer a -20°C ou -80°C para armazenamento a longo prazo. Certifique-se de rotular corretamente os tubos de armazenamento com informações detalhadas sobre a amostra.
Coletar e armazenar amostras!
A coleta de DNA é um processo crítico que requer precisão e cuidado para evitar contaminação e garantir a integridade da amostra. Seguindo este guia passo a passo, você pode coletar e armazenar amostras de DNA de maneira eficiente e segura para uma variedade de aplicações científicas e médicas.
Este artigo foi elaborado pelo site Deep Wiki, especializado em fornecer informações detalhadas e precisas sobre diversas áreas do conhecimento.
Referências:
- http://www.hairdnatest.com/hair_dna.html
- https://dnatesting.com/how-do-dna-samples-for-paternity-testing-become-contaminated/
- https://www.in.gov/isp/files/Child_DNA_Collection.pdf
- https://www.coletordigital.com.br/kit-de-coleta-de-evidencias-de-dna-da-cena-do-crime-dna100
- http://www.morgannickfoundation.com/programs/dna-id-kit-program/
- http://www.genealogyjunkie.net/dna-sample-collection.html
- http://naturalparentsnetwork.com/creating-a-dnafingerprint-id-kit-for-your-family/
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- https://www.salimetrics.com/article/collecting-and-handling-saliva-for-dna-analysis
- https://www.labmaricondi.com.br/blog/teste-de-dna-entenda-como-sao-feitos-os-exames-de-paternidade/#:~:text=Como%20%C3%A9%20feito%20o%20teste,chamados%20%22Sequenciadores%20de%20DNA%22.